ब्लाट (सोख्ता) जेल से जैविक अणुओं की एक किस्म के लिए संदर्भित करता है एक निश्चित मैट्रिक्स प्रक्रिया को हस्तांतरित किया गया.
संक्षिप्त परिचय
एक निश्चित मैट्रिक्स को जेल से स्थानांतरित विभिन्न जैविक अणुओं (सोख्ता) imprinting प्रौद्योगिकी कहा जाता है.
दक्षिणी 1975 में पहली आणविक दाग की अवधारणा का प्रस्ताव रखा. वह एक किस्में में विकृत होने की जेल में डीएनए टुकड़े के agarose जेल वैद्युतकणसंचलन, और फिर nitrocellulose की एक शीट (nitrocellulose, नेकां) जेल पर फिल्म, और के शीर्ष पर रखा शोषक कागज तौलिया, केशिका होगा सक्रिय सिद्धांत ठोस चरण अणु बनाने, नेकां झिल्ली को हस्तांतरित डीएनए टुकड़ा जेल. एक संकरण समाधान में नेकां झिल्ली युक्त एकल असहाय डीएनए अणु पूरक शाही सेना या एक डीएनए अणु के लिए बाध्य नेकां झिल्ली में मौजूद डीएनए दृश्यों के साथ संकरण के लिए एक और डीएनए या शाही सेना अणु (अर्थात जांच) के साथ चिह्नित किया जा सकता है द्वारा पर autoradiography या अन्य पता लगाने की तकनीक एक संकर अणु क्षेत्र दिखा सकते हैं. इस तकनीक सोख्ता कागज का उपयोग तो, अनुवाद धब्बा "सोख्ता" कहा जाता है, कागज पर स्याही को अवशोषित करने के लिए इसी तरह की है के बाद से.
बहुत तेजी से तकनीकी विकास चिन्ह जैविक अणुओं, व्यापक रूप से डीएनए, शाही सेना, प्रोटीन का पता लगाने में इस्तेमाल किया गया है. अक्सर लोग डीएनए सोख्ता दक्षिणी नामक तकनीक दाग होगा, आरएनए धब्बा तकनीक सोख्ता उत्तरी, पश्चिमी सोख्ता बुलाया वेस्टर्न ब्लॉट तकनीक, जेल दाग तकनीक डॉट धब्बा (डॉट सोख्ता) द्वारा नहीं कहा जाएगा बुलाया.
मौलिक
इस कार्रवाई के polymerization की प्रक्रिया से कई कार्रवाई बिंदु, याद किया जाएगा जब मोनोमर बहुलक के साथ संपर्क में आता है टेम्पलेट अणु (टेम्पलेट अणु) का गठन किया जाता है, जब टेम्पलेट अणु को हटाने के बाद, बहुलक अणु टेम्पलेट का एक स्थानिक विन्यास के लिए फार्म टेम्पलेट अणु एक चयनित पहचान विशेषताओं, और जैसे होने के एक छेद हो जाएगा, जिससे कि एक कई छेद के बिंदु मैच.
बुनियादी कदम
एक विलायक में 1 (भी porogen के रूप में जाना जाता है), टेम्पलेट अणु और कार्यात्मक मोनोमर कार्य समूहों सहसंयोजक या फार्म करने के लिए गैर covalently मेजबान अतिथि परिसरों पर निर्भर करती है;
(2) इस तरह के प्रकाश या monomers के गर्मी प्रेरित polymerization के रूप में सर्जक, के माध्यम से, एक crosslinking एजेंट जोड़ने, टेम्पलेट अणु आसपास कट्टरपंथी copolymerization द्वारा एक crosslinking एजेंट के साथ मेजबान अतिथि परिसरों एक उच्च जुड़े कठोर बहुलक फार्म करने के लिए;
3 बहुलक क्षालन या अणुओं की हदबंदी में अंकित.
इस बहुलक आणविक आकार और तीन आयामी गुहा मैच के लिए टेम्पलेट के आकार में पीछे छोड़ दिया है, और cavities के सटीक संरेखण उपयुक्त इमारत अगर मोनोमर के कार्य समूह द्वारा प्रदान की कार्यक्षमता को पूरक टेम्पलेट अणु के साथ एक कार्यात्मक समूह, शामिल किया गया था जो चयनात्मक रूप में इस बंद करने के लिए एक प्रमुख के रूप molecularly अंकित पॉलिमर की तरह. इस छेद टेम्पलेट अणु का चयन करेंगे, जिससे कि प्राकृतिक जैविक पहचान प्रणाली के समान है जो बहुलक विशिष्ट "स्मृति" सुविधा, दे देंगे और इसके अनुरूप विशेषताओं की पहचान की है.
वर्गीकरण
वर्तमान में, टेम्पलेट अणु के अनुसार monomer और बहुलक बिंदु अलग अलग तरीकों से कई भूमिकाओं के बीच बनाई है, आणविक imprinting प्रौद्योगिकी को दो श्रेणियों में बांटा जा सकता है:
1 सहसंयोजक फ्रांस (पूर्व इकट्ठे मोड)
अणुओं और कार्यात्मक मोनोमर्स बोरिक शांत, Schiff अड्डों, imines, acetal डेरिवेटिव, covalently मिल ही जाता है कि तिर्यक polymerization, hydrolysis और टेम्पलेट अणु को दूर करने के लिए इस्तेमाल अन्य विधियों के माध्यम से उत्पादित पॉलिमर के लिए फार्म polymerization प्रतिक्रिया से पहले अंकित molecularly बहुलक अंकित है.
(2) गैर सहसंयोजक विधि (आत्म विधानसभा विधि)
गैर सहसंयोजक बंधन विधि molecularly अंकित बहुलक सबसे प्रभावी और आमतौर पर इस्तेमाल किया विधि की तैयारी है. इन गैर सहसंयोजक बांड इतने पर electrostatic आकर्षण (आयन एक्सचेंज), हाइड्रोजन, एक धातु chelate, चार्ज हस्तांतरण, हाइड्रोफोबिक और वान डर वाल्स बल और शामिल हैं. हाइड्रोजन संबंधों द्वारा पीछा आयनों का सबसे महत्वपूर्ण प्रकार से एक,.
फ़ीचर
किताब करने के लिए 1, यानी यह अलग जरूरतों को पूरा करने के लिए अलग एमआईपी, के विभिन्न प्रयोजनों के हिसाब से तैयार किया जा सकता है.
(2) पहचान, यानी एमआइपी टेम्पलेट अणु के अनुसार अनुकूलित किया गया है विशेष रूप से टेम्पलेट अणु को पहचान सकते हैं.
, यह इस तरह के एंजाइम और सब्सट्रेट, प्रतिजन और एंटीबॉडी के लिए तुलनीय हार्मोन रिसेप्टर के रूप में प्राकृतिक जैविक आणविक मान्यता प्रणाली, के साथ प्रयोग किया जा सकता है, लेकिन यह रासायनिक संश्लेषण की विधि है, ताकि प्राकृतिक आणविक मान्यता है क्योंकि वहाँ है कि 3 व्यावहारिकता, प्रणाली जिससे उच्च स्थिरता और लंबे जीवन का प्रदर्शन, कठोर वातावरण का विरोध करने की क्षमता नहीं है.
आवेदन उदाहरण
रसायन के लिए 1 biomimetic सेंसर
, थर्मल, बिजली की एक किस्म के माध्यम से तो इस आणविक मान्यता संकेत कनवर्टर (पीजोइलेक्ट्रिक क्रिस्टल, इलेक्ट्रोड, प्रतिरोधों, आदि) के उत्पादन से, और, अंकित अणु एमआइपी उच्च चयनात्मकता के रूप में, यह आणविक मान्यता तत्वों biomimetic संवेदक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है प्रकाश संकेतों को परिवर्तित करने के लिए अन्य साधनों, विभिन्न छोटे अणु कार्बनिक यौगिकों की मात्रात्मक विश्लेषण मापा जा सकता है.
2 chromatographic जुदाई
एमआइपी सबसे व्यापक रूप से हाल के वर्षों में, अलग मिश्रण करने के लिए अपनी विशिष्ट कार्यों का उपयोग कर मान्यता प्राप्त, आंख को पकड़ने के लिए तीन आयामी, विशेष मान्यता चयनात्मक जुदाई पूरा हो गया है में से एक है. यह विभिन्न सोख्ता तकनीकों को लागू किया गया है टेम्पलेट अणु की एक विस्तृत श्रृंखला, छोटे अणुओं (जैसे अमीनो एसिड, दवाओं और हाइड्रोकार्बन के रूप में) या बड़े अणुओं या तो (जैसे प्रोटीन, आदि के रूप में) पर लागू होता है.
3 एसपीई
आमतौर पर, नमूना तैयार ठोस चरण निष्कर्षण द्वारा बदला जा सकता है जो आणविक imprinting तकनीक, के उद्भव के बाद से, विलायक निष्कर्षण शामिल किए गए हैं, और molecularly अंकित पॉलिमर लक्ष्य analytes की चयनात्मक संवर्धन का लाभ ले सकते हैं. एक कार्बनिक विलायक में अंकित बहुलक इस्तेमाल किया जा सकता है, अन्य के साथ तुलना में, एक जलीय घोल, निकासी की प्रक्रिया में इस्तेमाल किया जा सकता है, अद्वितीय फायदे हैं.
4 नकली प्राकृतिक एंटीबॉडी
What is southern blotting method